Page 54 - MaSzeSz hírcsatorna 2026/2.
P. 54
SZAKMAI - TUDOMÁNYOS ROVAT
módszerrel már 0,3–1,5 ng/L E2β koncent- receptorhoz való közvetlen kötődési képes- eszközökkel az egyedeken adott struktúrákat következtében a zebradánió embriók helyet-
ráció is szignifikáns sejtszaporodást indukál, ség vizsgálható, autonóm biolumineszcencia érintő eltérések fluoreszcens módon, valós tesíthetik a felnőtt halakon és emlős fajokon
ami jól jelzi a bioteszt nagy érzékenységét. változás (intenzifikáció) koncentráció-függő időben, in vivo monitorozhatóak nagy min- végzett kísérleteket is. Szakirodalmi adatok-
Az élesztőgombák élelmiszeripari jelentő- módon történő detektálásával. Az élesztőala- taáteresztő képességű tesztekben az állatok ra alapozva összességében megállapítható,
ségük mellett a káros környezeti feltételekre pú vizsgálatok hátránya az élesztő sejtfalának elpusztítása nélkül. Transzgenikus bioriporter hogy az ösztrogén hormonok kvalitatív kimu-
rendkívüli mértékben ellenálló eukariótákként megléte, valamint az aktív transzportmecha- vonalak közül ilyen a tg(cyp19a1b:GFP), amely tatási hatékonysága az alkalmazott biológiai
kiváló sejtmodellek is. Ezen okokból, vala- nizmusokban való különbség az emlős sej- az aromatáz (B) enzim cyp19a1b génjét kó- vizsgálat típusától és a meghatározás mód-
mint a tenyészthetőségük egyszerűségével tekhez képest, amik befolyásolhatják a vizs- dolja, melyben ösztrogénválasz következ- szerétől függően változik, a tanulmányok
és a könnyű genetikai módosíthatóságukkal gált vegyületek aktivitását (Chambers et al., ményeként egy riporter, zöld fluoreszcens azonban azt mutatják, hogy az EE2 és az E2
együtt, az élesztőket az 1970-es évek óta gyak- 2014; Freyberger et al., 2010; Freyberger & fehérje (GFP – Green Fluorescent Protein) a legpotensebb ösztrogénszerű vegyületek,
ran használják bioszenzorok biológiai eleme- Schmuck, 2005; Gubó et al., 2023; Jarošová indukciója következik be az embriók agyi régi- őket az E1 és az E3 követi (Abdelmoneim et
iként. Talán a legelterjedtebb és legismertebb et al., 2014; Körner et al., 1998, 1999; Kudłak ójában. Ennek a szteroidogén enzimnek a fel- al., 2020; Bakos et al., 2019; Brion et al., 2004;
módszer a génriporter-rendszereken alapu- et al., 2015; Legler et al., 2002; Legler et al., adata az androgének ösztrogénekké történő Csenki et al., 2022; Le Fol et al., 2017; More-
ló in vitro YES-teszt (Yeast Estrogen Screen 1999; Legler, Jonas, et al., 2002; Li et al., átalakulásának utolsó lépésének katalizálása. man et al., 2017; Petersen et al., 2013; Silva
assay), amely génmódosított, rekombináns 2012; Martin-Yken, 2020; Routledge & Sump- A cyp19a1b gén rendkívül érzékeny az öszt- Brito et al., 2022; Tsang, 2010).
élesztősejtekkel (Saccharomyces cerevisiae) ter, 1996; Sanseverino et al., 2005, 2009; Soto rogénekre és kiváló biomarker az ösztrogé- Az analitikai és biológiai módszerek kombi-
dolgozik, amelyekben az emberi ösztrogén- et al., 1995; Tóth et al., 2020). Az in vivo ge- naktivitás kimutatására (Le Fol et al., 2017; nálása biztosítja a legmegbízhatóbb képet
receptor aktiválása egy könnyen mérhető ri- rincesmodellek közül a halaknak jelentős sze- Petersen et al., 2013). Más ösztrogén-szen- az ösztrogének jelenlétéről és kockázatáról.
portergén (ERE-ket és β-galaktozidáz enzimet repük van a környezeti kockázatértékelésben, zitív vonalakban megjelenő fluoreszcens fe- Amennyiben a biológiai hatás magasabb,
kódoló lac-Z gént tartalmaz) kifejeződését mivel a vízi szervezeteket különösen érintik hérjék kifejeződése a vitellogenin biomarker mint amit a mért vegyületek koncentrációja
váltja ki. Az élesztősejtek három napig történő az EDC-k okozta szennyeződések. Ezért fehérje expressziójával van összekapcsolva, alapján várnánk, az arra utalhat, hogy egyéb,
inkubációját követően a tenyésztő közegbe széles körben használják őket az ösztrogén melyekben a zöld (tg(vtg1: EGFP)) (Abdelmo- nem mért vagy nem azonosított ösztro-
kiválasztódott β-galaktozidáz enzim meta- hatású anyagok vizsgálatára és azok poten- neim et al., 2020) és vörös (tg(vtg1:mCher- génszerű anyagok is jelen vannak. Fordított
bolizálja a kromogén szubsztrátot (klórfenol ciális fiziológiai hatásának modellezésére. ry)) (Bakos et al., 2019) riporterjel a májban, esetben, ha a biológiai aktivitás alacsonyabb,
vörös-β-D-galaktopiranozidot), ezáltal sárgá- A zebradánió a xenobiotikumokra való érzé- valamint a máj mellett, a faroknál és a szív- az jelezheti, hogy a mért vegyületek közül
ról vörösre változtatva a minta színét. A vörös kenysége miatt kiváló halmodell, az endokrin nél (tg(ERE: Gal4ff) (UAS: GFP)) (Moreman et némelyik metabolit formában, csökkent re-
szín intenzitása spektrofotometriásan köny- rendszere és a főbb élettani folyamatai erős al., 2017) fejeződik ki. Az ösztrogén hormo- ceptor-affinitással fordul elő. Az analitikai ér-
nyen mérhető. A módszerrel kapcsolatosan hasonlóságot mutat (~80%) más gerincesek- nok laboratóriumi expozíciós vizsgálatokban zékenység és specifitás folyamatos fejlődése
szabványosított protokollt (ISO 19040-1:2018) kel, beleértve az emlősöket és az embert már igen alacsony koncentrációkon (1–15 ellenére továbbra is kihívást jelent a nagyon
dolgoztak ki. Nem-szabványos változata a S. is. Jelentős szerepet töltenek be expozíciós ng/L) is szignifikáns endokrin válaszreakciót alacsony, környezeti szinteken jelenlévő keve-
cerevisiae fajnak a genetikailag módosított hatásvizsgálatokban azok a transzgenikus ri- váltanak ki zebradánió vonalakon. További rékek kockázatának megítélése. Ez indokolja,
BLYES törzs, mely kromoszómálisan egy hor- porter vonalak, amelyek sejt-, szövet-, vagy érv szól az embrionális életszakaszban lévő hogy a mérési stratégiák ne csak egyedi kom-
mon-specifikus sejtmagi receptort expresszál szerv(rendszer)-specifikus fluoreszcens jelet zebradániók felhasználása mellett, ugyan- ponensekre, hanem az összesített ösztrogén-
ösztrogén vegyületek expozíciójának hatásá- bocsátanak ki, egyedülálló rendszert bizto- is megfelelnek a 3R-elvnek és a vonatkozó hatásra is fókuszáljanak.
ra. A genomba integrált humán ösztrogén re- sítva az ED aktivitás kimutatására. Az utóbbi állatjóléti előírásoknak, mivel a tudományos
ceptor-α (hER-α) gén, valamint a megfelelő időben számos ösztrogénérzékeny bioszen- célokra felhasznált állatok védelméről szóló 8. A BioTreatED PROJEKT
hormonválasz elemek (ERE) mellett lux gé- zor-vonalat hoztak létre, melyek fő előnye, hatályos állatjóléti jogszabályok (2010/63/ A vízhiány fokozódásával a vízbiztonság
neket (Photorhabdus luminescens luciferáz hogy embrionális korban (5 napos korig) és EU irányelv) szerint a fejlődő zebradánió 5. és az ésszerű vízfelhasználás (különösen
gén kazettája – luxCDABE) tartalmazó plaz- lárva állapotukban testük átlátszó. Ez lehető- napot (önállóan táplálkozni képes életkor) az öntözés) stratégiai jelentőségűvé vált, ezért
midokat tartalmazó BLYES törzzsel a hER-α vé teszi, hogy fejlett képalkotó diagnosztikai követően tekinthető védett állatnak. Ennek a hígtrágya-alapú öntözővizek minőségének
54 55
