Page 42 - MaSzeSz hírcsatorna 2023/3.

A teljesség kedvéért a vizsgálat biokémiai (hidroximetil)-aminometán) adunk TTC he-
háttréről is ejtünk pár szót a túlzott „tudo- lyett. Inkubáció után minden mintához 40
mányosságot” mellőzve. A légzési folya- ml acetont mérünk, ezután tovább rázatjuk 2
matban számos enzim vesz részt, amelyek órán át. Az aceton kioldja a keletkezett TPF-t.
közül a dehidrogenázokat színreakcióval is 10 perc ülepedés után a töltetszuszpenziót
ki tudjuk mutatni TTC (2,3,5,-trifenil-tetra- leszűrjük (MN 619 G1/4), és a szűrlet abszor-
zólium klorid) segítségével. A dehidrogenáz banciáját 546 nm-en mérjük. A kapott ab-
aktivitás jól jellemzi a mikroorganizmusok szorbancia értékek ismeretében az előzőleg
által végzett lebontó folyamatok intenzitá- felvett kalibrációs egyenesről leolvassuk a TPF
sát. A szerves anyagok aerob mikrobiális le- koncentrációkat, majd egységnyi töltetmeny-
bontása egy membránhoz kötött elektront- nyiségre kiszámítjuk a dehidrogenáz aktivitást
ranszportláncon keresztül történik, ahol az alábbi képlet alapján:
az oxigén a végső elektronfelvevő (elekt-
ronakceptor) molekula. A lánc működése
közben a sejtek konvertibilis energiavalutá-
ja, az ATP (adenozin-5′-trifoszfát) képződik.
A dehidrogenázok hozzájárulnak a légzési
lánc működéséhez (hidrogén átvitelét segí-
tik). A dehidrogenáz aktivitás vizsgálat során CTPF: az abszorbancia értékből a kalibráció
az alkalmazott TTC tulajdonképpen meg- alapján számolt TPF koncentráció (mg/mL)
csapolja a légzési láncot, így elektron nem VA+TTC: a hozzáadott aceton és TTC oldat
a láncvégi oxigénre kerül, hanem a TTC térfogata (mL) (itt 50 mL)
molekulára, és ennek eredményeként vö- W: a bemért töltetmennyiség (g) (itt 20 g)
rös színű, vízben oldhatatlan trifenil-forma- TS: a töltet szárazanyag-tartalma (kg kg-1)
zánná (TPF) alakul át. A TPF mennyisége t: idő (h)
spektrofotometriásan meghatározható, A légzésintenzitáshoz hasonlóan az enzimak-
mivel vörös/rózsaszín színének intenzitása tivitás értékeket sem tudjuk jelenleg standard
485 nm-en etanollal szemben kimérhető. osztályozáshoz kötni, azaz a mintákat csak
[3] A rózsaszínű formazán tehát jelzi a sejt- egymással vethetjük össze, illetve biofilte-
szuszpenziók, tenyészetek, mikrobaközös- regységeket időben monitorozhatunk. A 3.
ségek stb. életképességét. Toxikus anyagok ábran egy megfelelően és egy nem megfele-
jelenlétében a dehidrogenáz enzimaktivitás lően működő biofilterre láthatunk példát Tel-
gátolt, ezért a TTC piros színe nem jelenik jes Oxigénfelvétellel (COU) és dehidrogenáz
meg. enzimaktivitás értékekkel.
20–20 g töltetet és 10–10 ml TTC oldatot
(1,5% TTC oldat 12,1 g L-1 Tris (hidroxime- A KOMPOSZTÉRETTSÉG VIZSGÁLATA
til)-aminometán pufferben) bemérünk egy- A komposztálás során egyrészt a szerves
egy jól zárható 100 ml-es mérőedénybe, anyagok egyszerű alapvegyületekre (szén-
majd lezárás után 20 órán keresztül 25 °C- dioxid, szulfát, nitrát és víz) bomlanak le,
on rázatjuk 150 rpm-mel. A vak mintához másrészt a nem mineralizálódott szerves
csak 10–10 ml Tris-HCl puffert (12,1 g L-1 Tris anyagokból humuszanyagok keletkeznek.

42